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恒遠十年資深技術與您分享“WB內參抗體選擇原則”
內參抗體種類很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、LaminB等,那么針對自己的實驗,我們該如何選擇呢?下面恒遠技術簡單介紹下選擇內參抗體應遵循的原則:一.樣本種屬來源:首先要考慮的就是實驗樣本來源于什么物種。1、哺乳動物的組織或者細胞樣本,通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來源實驗樣本,則可以選擇plantactin、Rubisco等。3、其他來源樣本研究較少,所以...
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選對您實驗真正所需的“膠原蛋白”
中文名稱:膠原蛋白CAS:9007-34-5規格:BR,I型,大分子包裝:5G、10G、50G英文名稱:Collagen其他名稱:膠原水解物;骨膠水解物;骨膠原水解物;膠原CAS號:9007-34-5分子量:~30萬道爾頓類型:TypeI活力:≥500u/mgItfundamentalstructuralunitisatropo-collagen,amolecularrodabout2600inlengthand15ASindiameterwithamolecularweig...
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正確選擇您所需要的細胞培養板
一、細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇:1)貼壁細胞一般用平底培養板2)懸浮型細胞的培養一般用V型3)U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞大部分細胞培養都用平底培養板,便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致,還便于MTT檢測。圓底培...
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本周探討--細胞培養失敗的主要原因???
消毒和滅菌微生物污染是造成細胞培養失敗的主要原因(一)物理消毒法1.紫外線消毒:紫外線是一種低能量的電磁輻射,可殺死多種微生物。革蘭陰性菌zui為敏感,其次是陽性菌,再次為芽孢,真菌孢子的抵抗力zui強。紫外線的直接作用是通過破壞微生物的核酸及蛋白質等而使其滅活,間接作用是通過紫外線照射產生的臭氧殺死微生物。直接照射培養室消毒,用法簡單,效果好。紫外燈的消毒效果同紫外燈的輻射強度和照射劑量呈正相關,輻射強度隨燈距離增加而降低,照射劑量和照射時間呈正比。因此紫外燈同被照射物的距...
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小牛血清使用注意事項以及正確的凍存方法
使用小牛血清時的注意事項具體如下:1.供血的新生小牛必須是健康牛的產仔,并在產后24小時內抽血,此期間不得吸取母乳。2.以無菌操作自頸動脈放血,并在無菌條件下分離血清及濾菌,全過程在36小時內完成。經濾菌的血清登一20IC保存。3.血清使用前需做細蔭、支原體培養及內毒素測定,在確實無污染的情況下方可使用。4.每批小牛血清測定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎培養墓和HAT培養墓中,對骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞進行培養,觀察小牛血清對瘤細胞和融合細胞的細胞毒性。若在2...
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根據歷史起源來談“植物組織培養應用前景”
19世紀30年代,德國植物學施萊登和德國動物學家施旺創立了細胞學說,根據這一學說,如果給細胞提供和生物體內一樣的條件,每個細胞都應該能夠獨立生活;1902年,德國植物學家哈伯蘭特細胞性的理論是植物組培的理論基礎。1958年,一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地,美國植物學家斯蒂瓦特等人,用胡蘿卜的嫩皮的細胞進行培養,終于得到了完整植株,并且這一植株能夠開花結果,證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞的預言。植物組培的簡單過程如下:剪接植物器官或組織——經過脫分化(也叫去分化)形成...
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根據歷史起源來談“植物組織培養應用前景
19世紀30年代,德國植物學施萊登和德國動物學家施旺創立了細胞學說,根據這一學說,如果給細胞提供和生物體內一樣的條件,每個細胞都應該能夠獨立生活;1902年,德國植物學家哈伯蘭特細胞性的理論是植物組培的理論基礎。1958年,一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地,美國植物學家斯蒂瓦特等人,用胡蘿卜的嫩皮的細胞進行培養,終于得到了完整植株,并且這一植株能夠開花結果,證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞的預言。植物組培的簡單過程如下:剪接植物器官或組織——經過脫分化(也叫去分化)形成...
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ELISA法細胞凋亡檢測操作步驟
細胞凋亡的發生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp~200bp或其倍數的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結構,可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法:1.收集細胞,離心后,用200µl溶細胞緩沖液重新懸浮,室溫下作用30min。(培養細胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣...